平板克隆實驗
平板克隆實驗形成項目介紹：當單個細胞在體外增殖6代以上，其后代所組成的細胞群體，稱為集落或克隆。每個克隆含有50以上的細胞，大小在0.3-1.0mm之間。集落形成率表示細胞的獨立生存能力，各種理化因素可能導致細胞的克隆形成能力發生改變，通過計數克隆形成率可對單個細胞的增殖潛力做定量分析，了解細胞的增殖能力和獨立生存能力。軟瓊脂培養或平板克隆是長用的方法。
一、實驗步驟
1. 細胞接種
消化對數生長期細胞，制成單細胞懸液，計數。
按500~2000 個細胞 / 孔接種到 6 孔板中。
一般設：對照組、處理組，每組3 個復孔。
輕輕十字混勻，放入培養箱常規培養。
細胞密度根據細胞系調整：長得快、易克隆的種 500–1000；難克隆的 1000–2000。
2. 培養（關鍵）
繼續培養 7~14 天，每 2~3 天換一次液。肉眼看到明顯細胞克隆團時即可終止。
3. 終止培養
棄培養基，用PBS 輕輕洗 1~2 次。
4. 固定
加入4% 多聚甲醛或甲醇，固定 15~30 min。棄固定液，PBS 洗一遍。
5. 染色
加入0.1%~1% 結晶紫染液，室溫染色 15~30 min。用清水緩慢洗掉多余染液，晾干。
6. 計數與計算
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