細(xì)胞劃痕

 細(xì)胞劃痕服務(wù)是項(xiàng)目組成之一，該項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)由經(jīng)驗(yàn)豐富的人員進(jìn)行操作。

 細(xì)胞劃痕服務(wù)本公司實(shí)驗(yàn)過程所用試劑，，已實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備性。

一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

• 試劑：完q培養(yǎng)基、PBS、無血清培養(yǎng)基（可選）

• 耗材：6/12/24 孔板、10 μL 槍頭、顯微鏡、相機(jī)

• 細(xì)胞：貼壁細(xì)胞，匯合度 70%~90%

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1. 細(xì)胞鋪板

• 將細(xì)胞接種到孔板中，培養(yǎng)至細(xì)胞鋪滿孔底 90%~100% 匯合（形成單層）。

2. 饑餓處理（可選，推薦）

• 吸去完q培養(yǎng)基，PBS 洗 1 次。

• 加入無血清 / 低血清培養(yǎng)基，饑餓 12–24 h，抑制增殖，只測(cè)遷移。

3. 劃痕

• 用無菌 10 μL 槍頭，在孔中y垂直、勻速、直線劃一道痕。

• 每孔盡量保持劃痕寬度、力度一致。

4. 洗去脫落細(xì)胞

• 吸掉舊培養(yǎng)基，PBS 洗 2–3 次，洗掉漂浮死細(xì)胞，只留下清晰劃痕。

5. 加入培養(yǎng)基培養(yǎng)

• 加入無血清 / 低血清培養(yǎng)基。

• 放入培養(yǎng)箱，分別在 0 h、6 h、12 h、24 h、48 h 拍照。

6. 拍照記錄

• 每孔固定相同位置、相同倍數(shù)拍照（一般 40×、100×）。

• 記錄劃痕寬度變化。

7. 數(shù)據(jù)分析