olink蛋白組技術服務
一、核心原理:PEA 技術
1. 抗體對 + DNA 標簽:每個目標蛋白對應一對抗體,分別偶聯互補的單鏈 DNA(各帶蛋白特異條形碼)。
2. 雙識別 + 鄰位雜交:只有兩個抗體同時結合同一蛋白,兩條 DNA 才會靠近、雜交成雙鏈。
3. 延伸 + 擴增 + 定量:DNA 聚合酶延伸→PCR 擴增→qPCR/NGS 讀數;信號強度 = 蛋白濃度。
關鍵優勢:非特異性結合不會讓 DNA 靠近,幾乎無背景,特異性可達 99.7%。
二、技術特點(為什么選 Olink?)
超微量:1–6 μL血清 / 血漿即可(比傳統 ELISA 少 100 倍)。
超高靈敏:檢測下限 fg/mL 級,能抓到極低豐度的細胞因子、信號蛋白Olink。
超寬動態:10 個數量級,同時覆蓋高豐度(白蛋白)與低豐度(炎癥因子)Olink。
高通量:一次可測 96–384 樣本;蛋白數:Target(48/96)、Explore(384)、Reveal(~1000)。
高重現:CV <10%(板內)、<20%(板間),適合大隊列(上萬例)。
樣本類型:血清、血漿、腦脊液、尿液、細胞上清、組織裂解液。
三、主流產品 Panel(怎么選?)
Target 96/48:qPCR 檢測,48/96 蛋白,驗證階段、小隊列、低預算。
Explore 384:NGS 檢測,384 蛋白,覆蓋炎癥、免疫、腫瘤、代謝,常用。
Reveal(新品,2026):NGS,~1000 蛋白,全面炎癥 / 免疫 + 疾病相關 + cis-pQTL 蛋白,發現級Olink。
Explore HT:超高通量,384 蛋白 ×384 樣本,超大隊列(如 UK Biobank)。
四、實驗流程(5 步出結果)
1. 樣本準備:血清 / 血漿,1 μL 足夠。
2. PEA 反應:加抗體對→孵育結合→DNA 雜交延伸。
3. PCR 擴增:生成帶條形碼的擴增子。
4. NGS/qPCR 檢測:測序或熒光定量,得到每個蛋白的讀數。
5. 數據分析:標準化→差異蛋白→通路富集→ biomarker 篩選。
五、Olink vs 質譜(LC-MS)vs 傳統 ELISA
Olink:靶向、超高靈敏、超微量、高通量、低 CV;適合血液 / 體液、大隊列、低豐度蛋白。
LC-MS:無偏、全蛋白組、可發現新蛋白;但靈敏度低、CV 高、需大量樣本;適合組織 / 細胞、發現階段。
ELISA:單指標、低通量、高成本;適合少數指標驗證。
一句話:Olink 是血液蛋白組的 “黃金標準",質譜是組織蛋白組的 “金標準",二者互補。
六、應用場景(適合做什么?)
疾病 Biomarker 篩選:腫瘤早篩、自身免疫病、神經退行性疾病(如阿爾茨海默病)、心血管病;AUC 可達 0.9+。
大隊列流行病學:UK Biobank、中國慢性病隊列,上萬樣本的蛋白組掃描Olink。
藥物研發:靶點驗證、藥效監測、耐藥機制、pQTL 研究(蛋白數量性狀位點)Olink。
多組學整合:Olink(蛋白)+ 基因組 + 轉錄組 + 代謝組,構建疾病分子網絡。
免疫與炎癥研究:細胞因子、趨化因子、免疫檢查點蛋白的原位 / 循環水平分析Olink。
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