細(xì)胞焦亡的多米諾效應(yīng)-胞外囊泡傳播新途徑

研究背景：

細(xì)胞焦亡（Pyroptosis）又稱細(xì)胞炎性壞死，是一種程序性細(xì)胞死亡方式，近年來才被發(fā)現(xiàn)并證實。細(xì)胞焦亡是由gasdermin（GSDMs）介導(dǎo)的，具體為gasdermin-D（GSDMD）在被caspase-1或caspase-11/4/5切割后，釋放出其N端結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域具有結(jié)合膜脂并在細(xì)胞膜上打孔的活性，導(dǎo)致細(xì)胞滲透壓變化而發(fā)生脹大，直至最終細(xì)胞膜破裂。這一過程中，細(xì)胞會釋放促炎細(xì)胞因子，如IL-1β和IL-18，以及損傷相關(guān)分子模式（DAMPs），進(jìn)而激活強烈的炎癥反應(yīng)。

細(xì)胞焦亡是機(jī)體一種重要的天然免疫反應(yīng)，在抗擊感染中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。適度的細(xì)胞焦亡可有效清除被病原體感染的細(xì)胞，通過增強炎癥反應(yīng)，幫助免疫系統(tǒng)識別并清除病原體。然而，過度的細(xì)胞焦亡可能導(dǎo)致過度和持續(xù)的炎癥反應(yīng)，從而引發(fā)炎癥性疾病，但是細(xì)胞焦對炎癥的潛在影響機(jī)制，尚不清楚。2024年12月26日，Wright Skylar S及其團(tuán)隊探討了焦亡細(xì)胞對旁觀者細(xì)胞誘發(fā)焦亡的作用機(jī)制。

研究目的：

本研究旨在探索細(xì)胞焦亡是否能夠傳播到旁觀者細(xì)胞，以及這種傳播的機(jī)制和潛在影響。

研究方法：

細(xì)胞共培養(yǎng)實驗： 研究人員使用細(xì)胞共培養(yǎng)實驗研究了細(xì)胞焦亡細(xì)胞是否能夠誘導(dǎo)旁觀者細(xì)胞的死亡。

小鼠模型： 研究人員使用小鼠模型研究了細(xì)胞焦亡細(xì)胞是否能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)旁觀者細(xì)胞的死亡。

胞外囊泡（EVs）分離和鑒定： 研究人員通過超速離心和尺寸排除色譜法（SEC）從細(xì)胞焦亡細(xì)胞中分離和鑒定了EVs，使用DNA-PAINT超分辨率顯微鏡技術(shù)和免疫電子顯微鏡技術(shù)來揭示細(xì)胞焦亡EVs上的GSDMD孔結(jié)構(gòu)。

EVs 誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的機(jī)制：研究人員研究了 EVs 誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的機(jī)制，并證實了 EVs 上的 GSDMD 穴孔結(jié)構(gòu)。

EVs 的致病性：研究人員研究了 EVs 的致病性，并證實了 EVs 能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)和組織損傷。

實驗結(jié)果：

1、細(xì)胞焦亡可以傳播到旁觀者細(xì)胞的質(zhì)膜上： 研究人員發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞焦亡細(xì)胞可以誘導(dǎo)旁觀者細(xì)胞的死亡，這種傳播是獨立于細(xì)胞接觸的，并且通過分泌因子介導(dǎo)。

圖1. 炎癥小體介導(dǎo)的焦亡在體外和體內(nèi)細(xì)胞間傳播

2、EVs 作為傳播介質(zhì)： 研究人員發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞焦亡細(xì)胞釋放的 EVs 包含活化的 GSDMD 穴孔，并將其轉(zhuǎn)移到旁觀者細(xì)胞上，導(dǎo)致旁觀者細(xì)胞的死亡。此外，研究還發(fā)現(xiàn)這些EVs能夠觸發(fā)多種細(xì)胞類型的旁觀者細(xì)胞死亡，包括巨噬細(xì)胞、HeLa細(xì)胞和HEK293T細(xì)胞。

圖2 細(xì)胞焦亡的胞外囊泡介導(dǎo)細(xì)胞之間的焦亡傳播

3、GSDMD 穴孔的移植： 研究人員使用DNA-PAINT超分辨率顯微鏡和免疫電鏡技術(shù)證實了 EVs 上的 GSDMD 穴孔結(jié)構(gòu)，并證明了 GSDMD 穴孔可以從 EVs 轉(zhuǎn)移到旁觀者細(xì)胞膜上，導(dǎo)致旁觀者細(xì)胞的細(xì)胞外裂解。

圖3 細(xì)胞焦亡細(xì)胞釋放胞外囊泡通過GSDMD傳播旁觀者細(xì)胞焦亡發(fā)生

4、EVs 的致病性： 研究人員證實了細(xì)胞焦亡 EVs 能夠在體內(nèi)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)和組織損傷，并增強已有的炎癥反應(yīng)。

圖4 焦亡性囊泡攜帶GSDMD膜孔對旁觀者細(xì)胞產(chǎn)生致病效應(yīng)

實驗結(jié)論：

本研究揭示了細(xì)胞間通過EVs傳播GSDMD孔，從而傳播細(xì)胞焦亡的機(jī)制。這種通過EVs的GSDMD孔移植在旁觀者細(xì)胞上的過程，揭示了疾病相關(guān)旁觀者細(xì)胞死亡的級聯(lián)關(guān)系，產(chǎn)生多米諾效應(yīng)。

個人啟發(fā)：

這項研究為理解細(xì)胞焦亡在疾病中的作用提供了新的視角，尤其是在敗血癥等炎癥性疾病中。由于細(xì)胞焦亡與廣泛的細(xì)胞死亡和不良預(yù)后相關(guān)，這項研究可能有助于開發(fā)新的治療策略，即針對細(xì)胞焦亡 EVs 的治療方法：例如焦亡型EVs 清除劑或焦亡型 EVs 抑制劑，以抑制細(xì)胞焦亡傳播和炎癥性疾病。此外，這項研究還可能對癌癥治療和抗腫瘤免疫反應(yīng)有所啟發(fā)，因為細(xì)胞焦亡在調(diào)節(jié)抗腫瘤免疫中也扮演著角色。

感染性疾病治療：

1）增強抗菌免疫反應(yīng): 細(xì)胞焦亡 EVs 可以通過釋放促炎細(xì)胞因子和免疫原性物質(zhì)來激活免疫系統(tǒng)，并增強抗菌免疫反應(yīng)。因此，細(xì)胞焦亡 EVs 可以作為一種免疫調(diào)節(jié)劑，用于治療感染性疾病。

2）靶向病原體: 細(xì)胞焦亡 EVs 可能含有抗微生物肽或抗體，可以直接靶向和殺滅病原體。 因此，細(xì)胞焦亡 EVs 可以作為一種抗微生物治療劑，用于治療感染性疾病。

抗腫瘤治療包括：

1）免疫原性細(xì)胞死亡(ICD): 細(xì)胞焦亡是一種 ICD 形式，可以促進(jìn)腫瘤抗原的釋放和抗原呈遞，從而激活免疫系統(tǒng)并增強抗腫瘤免疫反應(yīng)。因此，細(xì)胞焦亡 EVs 可以作為一種腫瘤疫苗，用于增強抗腫瘤免疫治療的效果。

2）靶向腫瘤血管生成: 細(xì)胞焦亡 EVs 可能含有抑制腫瘤血管生成的因子，例如血管生成抑制因子或 miRNA。因此，細(xì)胞焦亡 EVs 可以作為一種抗血管生成治療劑，用于抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移。

3）調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境: 細(xì)胞焦亡 EVs 可以通過調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子來抑制腫瘤生長。例如，細(xì)胞焦亡 EVs 可以抑制腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞 (TAMs) 的募集和活化，從而抑制腫瘤生長。

自身免疫性疾病治療：

調(diào)節(jié)免疫反應(yīng): 細(xì)胞焦亡 EVs 可以通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能和活性來抑制自身免疫反應(yīng)。 因此，細(xì)胞焦亡 EVs 可以作為一種免疫調(diào)節(jié)劑，用于治療自身免疫性疾病。

組織修復(fù)和再生：

促進(jìn)組織修復(fù): 細(xì)胞焦亡 EVs 可能含有促進(jìn)組織修復(fù)和再生的因子，例如生長因子或細(xì)胞因子。 因此，細(xì)胞焦亡 EVs 可以作為一種組織修復(fù)和再生治療劑，用于治療組織損傷和疾病。